Cáccông cụ chỉnh sửa bộ gen đã nhanh chóng được các nhà khoa học thực vật áp dụngđể khám phá chức năng gen và cải tiến cây trồng. Thách thức kỹ thuật hiện tạilà tạo ra các đột biến điểm mục tiêu chính xác và có thể dự đoán một cách hiệuquả có giá trị cho mục đích nhân giống cây trồng. Cytidine (CBE) là các công cụcó nguồn gốc CRISPR / Cas9 được phát triển gần đây để chỉ đạo chuyển đổi cơ sởC-to-T. Sự tích hợp bộ gen ổn định của các thành phần CRISPR / Cas9 thông quachuyển đổi được tổ chức bởi Agrobacterium là phương pháp được sử dụng rộng rãinhất trong các cây hai lá mầm.
Tuynhiên, việc loại bỏ DNA ngoại lai có thể khó đạt được, đặc biệt là ở thực vậtnhân giống. Trong nghiên cứu này gen acetolactate synthase ( ALS ) trong càchua và khoai tây bởi một CBE sử dụng Agrobacterium. Nghiên cứu đãchỉnh sửa thành công và hiệu quả các cơ sở cytidine được nhắm mục tiêu, dẫn đếncác nhà máy kháng chlorsulfuron với hiệu suất phiên bản cơ sở chính xác lên đến71% trong cà chua. Quan trọng hơn, các tác giả đã sản xuất các loạicây được chỉnh sửa 12,9% và 10% nhưng không có gen trong thế hệ đầu tiên ở càchua và khoai tây. Một cách tiếp cận như vậy được dự kiến sẽ làm giảm các tácđộng xấu do sự tích hợp ngẫu nhiên của gen chuyển vào bộ gen chủ. Cách tiếp cậnthành công của các tác giả mở ra những quan điểm mới cho kỹ thuật bộ gen bằngviệc đồng phiên bản ALS với (các) gen khác, dẫn đến các cây trồng không có genchuyển có những đặc điểm mới quan tâm.
Cáctác giả đã thiết lập một chiến lược đơn giản, hiệu quả và tiết kiệm chiphí để sản xuất các loại thực vật được chỉnh sửa và chuyển gen trong cà chua vàkhoai tây, sử dụng biểu hiện của Agrobacterium của CBE. Hệ thống này có thểđược chuyển giao cho nhiều loài khác tương thích với biến đổi Agrobacterium, mởrộng phạm vi của hộp công cụ CRISPR để tạo ra các cây không có DNA ngoại lai,đặc biệt là ở các loài và cây được nhân giống thực vật. Vì chỉnh sửa đã đượcbáo cáo đối với cà chua và gạo, việc chỉnh sửa đồng thời của genALS với một gen quan tâm khác sẽ cho phép lựa chọn các sự kiện chỉnh sửa thiếusự chèn DNA ngoại lai không mong muốn và do đó tạo thành một triển vọng đầy hứahẹn cho việc sử dụng công cụ này, đặc biệt là đối với các loài được nhân giốngthực vật. Chiến lược như vậy sẽ làm giảm các tác động tiềm tàng của việc tíchhợp ngẫu nhiên T-DNA vào bộ gen chủ và hạn chế rủi ro.